中文名稱(chēng): 蛋白酶 K
中文同義詞: 蛋白酶K;蛋白激酶K溶液;ML蛋白酶K溶液;重組蛋白酶K;20MG/ML蛋白酶K溶液;蛋白酶K溶液(20 MG/ML);蛋白酶K 來(lái)源于林伯氏白色念球菌
英文名稱(chēng): Proteinase K
CAS號(hào):39450-01-6
蛋白酶K原料廠(chǎng)家現(xiàn)貨熱銷(xiāo)
用途:科研、實(shí)驗(yàn)。廣譜蛋白酶,95C 加熱10 分鐘,則完全失活。
蛋白酶K由于能夠消化角蛋白(kratin)因此被命名為蛋白酶K。蛋白酶K家族包含了各種由真菌、酵母及革蘭氏陰性細(xì)菌分泌的細(xì)胞內(nèi)肽酶,其中細(xì)菌分泌的酶有高度的序列相似性(>55%)。林伯氏白色念球菌(Tritirachiumalbum Limber)分泌產(chǎn)生蛋白酶K是該家族的模式蛋白。蛋白酶K對(duì)大多數(shù)底物均有切割活性,但是偏好于帶有脂肪族及芳香烴的肽鏈。其屬于絲氨酸蛋白酶,擁有典型的絲氨酸活性位點(diǎn):Asp39–His69–Ser224 。其含有一個(gè)單練肽鏈包含277氨基酸位點(diǎn),并擁有2個(gè)二硫鍵和一個(gè)空置的半胱氨酸位點(diǎn)以及兩個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn)。
蛋白酶K的應(yīng)用主要為核酸提取時(shí)去除DNA酶和RNA酶,并且可將結(jié)合于基因組上的組蛋白去除,還可用于堿性磷酸酶的失活。目前分子生物學(xué)技術(shù)已應(yīng)用于許多檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中,例如轉(zhuǎn)基因檢測(cè)、動(dòng)物屬性檢測(cè)、致病微生物檢測(cè)等。在分子生物學(xué)檢測(cè)中核酸的提取質(zhì)量直接影響了后續(xù)PCR反應(yīng)的擴(kuò)增效率。許多標(biāo)準(zhǔn)在核酸提取步驟中都設(shè)立了添加蛋白酶K消化的步驟,以期提取較純的核酸。為了保護(hù)核酸,分子生物學(xué)核酸提取實(shí)驗(yàn)中通常含有EDTA等試劑,由于EDTA可以與金屬離子絡(luò)合,因此可能會(huì)導(dǎo)致酶活性受到影響;并且通常為pH8.0時(shí)和55℃條件下進(jìn)行消化,不同pH值和溫度條件會(huì)使得酶活性受到影響。
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